Взятие биоматериала производят до применения курса антибактериальной терапии или не менее чем через 14 дней после ее завершения.
Пробы биоматериала необходимо собирать следующим образом:
— до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;
— в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное для исследования количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;
— с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов, полученных, например, при исследовании мокроты, проб из носа, глотки (зева), гениталий и др.
Общие требования к доставке проб биоматериала в микробиологическую лабораторию
Все собранные пробы отправляют в микробиологическую лабораторию немедленно после получения, за исключением случаев использования емкостей с транспортными средами, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке.
Это необходимо для:
— сохранения жизнеспособности возбудителей и возможности выделения микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Haemophilus и др.);
— предотвращения избыточного роста быстрорастущих и активных микроорганизмов;
— поддержания соотношения исходных концентраций изолятов при наличии в пробе микробных ассоциаций;
— сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисептиками, используемыми местно, которые могут обладать антибактериальной активностью;
— объективизации клинического диагноза инфекционно-воспалительного заболевания и оценки результатов терапии.
При невозможности немедленной доставки патологического материала в бактериологическую лабораторию допускается хранение транспортных сред с образцами в термостате при температуре 37ºС в течение 18-24 часов.
ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ К СБОРУ ОБРАЗЦОВ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Для того, чтобы выделить и идентифицировать микроорганизм, причиняющий вред нашему здоровью, кроме выполнения методики лабораторного исследования не менее значимым является и процесс правильного забора материала!
Достоверность и качество бактериологического исследования во многом зависит от техники сбора биологического материала, сохранности микроорганизмов при транспортировке пробы в лабораторию, особенно для сохранения жизнеспособности микроорганизмов, требующих особые условия культивирования. Поэтому каждая вторая ошибка в общем числе лабораторных ошибок приходится на преаналитический этап!
В этой статье мы познакомим Вас с Основными правилами забора материала для бактериологического исследования. А они следующие:
1. Сбор биологического материала необходимо производить до начала антимикробной терапии.
2. Кровь, спинномозговая жидкость, отделяемое ран собирается медицинским работником медицинской организации;
отделяемое зева, носа, ректальные мазки могут быть забраны в лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Тамбовской области (г. Тамбов, ул. Рахманинова, 5-а кабинет 19),
моча, мокрота, кал — собираются самостоятельно.
3. Материал забирается в стерильную лабораторную посуду стерильным инструментом (следует избегать загрязнения пробы биологического материала при заборе и транспортировке), это может привести к получению ошибочных результатов анализа.
4. Собранный материал доставляются в лабораторию (г. Тамбов, ул. Рахманинова, 5-а кабинет 19).
5. Для забора материала можно использовать одноразовые пластиковые контейнеры, приобретенные в аптеке. Стерильную посуду, необходимые транспортные системы для самостоятельного забора материала, а также для забора в медицинской организации, можно получить в лаборатории (г. Тамбов, ул. Рахманинова, 5-а кабинет 19).
6. Доставка биоматериала должна осуществляться в течение 2 часов с момента забора.
При невозможность осуществить доставку в указанный период следует использовать специальные транспортные системы, способные продлить время доставки до 48ч.
7. Для всех микробиологических исследований рекомендуется прекращение применения антибактериальных препаратов за 7-10 дней до взятия материала.
8. При выявлении микроорганизмов при исследовании в лаборатории проводится определение чувствительности к антибиотикам.
В лаборатории проводят исследование материала:
— Отделяемое зева и носа
на дифтерию, коклюш, менингококк, микрофлору, в т.ч. стафилококк, стрептококк, гемофильную палочку при признаках заболевания.
Материал из зева и носа берут стерильными ватными тампонами.
Перед забором отделяемого из носа необходимо очистить нос от слизи с помощью чистой одноразовой салфетки.
Материал из зева берут натощак (до питья или полоскания) или через 3-4 часа после приема пищи.
— Мокроту
на пневмококк, стрептококк, стафилококки, клебсиеллы и др. при подозрении на бронхит, пневмонию.
Собирают утреннюю порцию мокроты, выделяющуюся во время приступа кашля, содержащую гнойные комочки. Не следует собирать слюну и слизь!
Перед забором надо почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой.
Для сбора мокроты используют стерильные одноразовые контейнеры с завинчивающими крышками.
— Мочу (в норме стерильна)
на бактериурию (наличие и количество микроорганизмов в моче) при подозрении на воспалительные заболевания мочевой системы.
Для анализа мочи собирают утреннюю среднюю порцию мочи после туалета наружных половых органов в количестве 30 мл в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой.
Сбор мочи необходимо проводить до начала медикаментозного лечения и не ранее 10-14-ти дней после проведенного курса лечения для контроля.
— Испражнения на сальмонеллез, дизентерию, эшерихиоз, кампилобактериоз, условно-патогенные микроорганизмы, дисбактериоз
при признаках кишечной инфекции, дисфункции кишечника, пищевых отравлениях.
Пробу фекалий собирают в стерильную посуду (контейнер с ложкой –шпателем) у детей раннего возраста из подгузника, у пациентов старшего возраста — из помещенного в горшок или судно одноразового полиэтиленового пакета или одноразовой пластиковой емкости с разных мест, при наличии патологических примесей (слизь, кровь, хлопья, гной) их обязательно включают в пробу.
Не проводится исследование кала на дисбактериоз во время лечения биопрепаратами, после лечения — не раннее чем через 1 месяц.
— Отделяемое женских и мужских половых органов исследуется на выявление микроорганизмов, свидетельствующих о заболевании (воспалении), забор материала осуществляет врачом (гинеколог/уролог) .
— Грудное молоко
исследуется на выявление микроорганизмов, свидетельствующих о воспалении.
Перед сбором материала руки и грудь помыть с мылом, вытереть чистым полотенцем, обработать руки, соски и около сосковую
область молочных желез ватным тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Первые 10-15 мл сцеженного молока выливают, для анализа не используются.
Собирают для исследования по 3-4 мл молока из каждой груди в отдельный стерильный контейнер (подписать правая и левая), доставить в лабораторию в течение 2-х часов после сбора.
— Пробы при инфекционно-воспалительных процессах уха, глаз , кожи собирает врач стерильным тампоном.
Накануне, за 6 — 8 ч (ночь), отменяют все медикаменты и процедуры.
— Кровь на стерильность забирают из вены шприцем в процедурном кабинете, помещают пробирку (флакон) с транспортной средой (можно взять в лаборатории).
— Кровь на наличие антител к сальмонеллезу, брюшному тифу (на антитела к Vi антигену сальмонелл) забирают из вены в процедурном кабинете медицинской организации в стерильную пробирку .
Результаты исследований на наличие инфекций зависят от периода инфицирования и состояния иммунной системы, поэтому отрицательный результат полностью не исключает инфекции. На раннем этапе заболевания антитела отсутствуют. Для подтверждения наличия инфекционного заболевания для выявления нарастания титра антител рекомендуется провести повторное исследование крови через 10-14 дней.
— Кровь на наличие защитных антител (иммунитета) к возбудителям дифтерии, столбняка, коклюша до или после прививки, отсутствии сведений о прививках, после перенесенного заболевания забирают из вены в процедурном кабинете медицинской организации в стерильную пробирку .
Результат выдают с указанием титра антител (в сравнении с защитным титром ).
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Тамбовской
области» готов оказать Вам помощь в диагностики инфекционных заболеваний.
1. Инструкция по сбору, хранению и транспортировке
биологического
материала для лабораторных исследований
|
► Биологический
► Необходимо |
Правила
взятия, хранения и транспортировки
биоматериала
для
выявления возбудителей заболеваний
методом ПЦР
1.1. Общие рекомендации
1.1.1.
Взятие биоматериала производится из
предполагаемого места обитания
микроорганизмов и развития инфекции.
1.1.2.
Количество забранного материала должно
быть небольшим. Избыток отделяемого,
слизь и гной отрицательно влияют на
качество выделения ДНК и способствуют
деградации ДНК при хранении и
транспортировке.
1.1.3. При
внесении биоматериала, взятого у пациента
зондом с ватным тампоном или щеточкой,
в пробирку типа эппендорф с буферным раствором,
необходимо:
— соблюдать
стерильность;
— прежде,
чем погружать собранный на тампоне
(щеточке) биоматериал в раствор, размазать
его по сухой стенке пробирки, затем
смочить тампон (щеточку) в растворе и,
вращая зонд, тщательно смыть весь
материал со стенки пробирки и тампона
(щеточки);
— по
возможности отжать тампон о стенку
пробирки, удалить зонд с тампоном
(щеточкой) и закрыть пробирку.
1.2. Способы взятия биоматериала для исследований методом пцр
1.2.1. Соскобы. Для
соскобов используются одноразовые
стерильные зонды, имеющие ватный тампон
с повышенной адсорбцией или «щеточки»,
реже — ложки Фолькмана, малые ушные ложки
или аналогичные инструменты со слегка
затупленными краями. Поскабливающими
движениями собрать материал. Исследуемый
материал должен содержать возможно
большее количество эпителиальных клеток
и минимальное количество слизи, примесей
крови и экссудата. Внести материал в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором (см. раздел 1.1.).
Соскоб
из цервикального канала: перед
взятием соскоба необходимо удалить
избыток слизи стерильным ватным тампоном,
обработать шейку матки стерильным
физиологическим раствором. Зонд ввести
в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5
см, избегая соприкосновения со стенками
влагалища, и поскабливающим движением
(не до крови) собрать материал. Небольшое
количество эритроцитов в пробе не влияет
на результат анализа. При наличии эрозии
шейки матки материал берут с границы
здоровой и измененной ткани.
Соскоб
из уретры: зонд
ввести в уретру (у мужчин — на глубину
2-4 см) и несколькими вращательными
движениямисобрать
материал. Накануне перед взятием
материала допускается провокация
(острая пища, алкоголь и др.). Рекомендуется
воздержаться от мочеиспускания в течение
1-2-х часов перед взятием пробы. При
наличии обильных гнойных выделений
соскоб надо брать не позже, чем через
15 минут после мочеиспускания.
Соскоб
с конъюнктивы берут,
предварительно проведя анестезию глаза
0,5% раствором дикаина. Вывернув веко,
зондом с ватным тампоном (либо глазным
скальпелем) собрать эпителиальные
клетки с конъюнктивы.
Соскоб
из прямой кишки: зонд
ввести в анальное отверстие на глубину
3-4 см и вращательным движением собрать
материал.
1.2.2. Мазки. Одноразовым
стерильным зондом с ватным тампоном
или щеточкой взять небольшое количество
отделяемого (со сводов влагалища, из
зева, носоглотки и др.) и перенести в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором (см. раздел 1.1.).
1.2.3. Кровь. Для
исследований методом ПЦР кровь должна
быть нативной (не
свернувшейся).
Кровь
собрать асептически, путем венопункции
— в фирменную пробирку (2-3 мл) с
антикоагулянтом ЭДТА (гепарин
в качестве антикоагулянта использовать
нельзя!),
аккуратно перемешать, плавно переворачивая
пробирку.
Кровь
с ЭДТА является биоматериалом для
следующих групп исследований:
—
генетические исследования (момент
забора крови значения не имеет).
—
выявление возбудителей инфекций (наиболее
информативными являются пробы, взятые
при ознобе, повышенной температуре, т.
е. предположительно во время виремии
или бактериемии).
1.2.4. Моча. В
пустой стерильный контейнер с плотно
завинчивающейся крышкой собирают
утреннюю первую или среднюю порцию мочи
в количестве минимум 10 мл. Если забор
мочи проводят днем, то перед этим пациент
не должен мочиться 1,5-3 часа.
1.2.5. Мокрота. Утром
провести санацию ротовой полости и
горла (прополоскать раствором питьевой
соды). Собрать мокроту в пустой стерильный
широкогорлый флакон.
1.2.6. Биоптат. Взятие
материала осуществлять из зоны
предполагаемого местонахождения
возбудителя инфекции, из поврежденной
ткани или пограничного с повреждением
участка. Поместить биоптат в стерильную
пробирку типа эппендорф с буферным
раствором.
1.2.7. Слюна,
желудочный сок, ликвор, синовиальная
жидкость. Слюна
(1-5 мл), желудочный сок (1-5 мл), ликвор
(1-1,5 мл) — поместить в пустую стерильную
пробирку (контейнер).
1.2.8. Сок
предстательной железы. После
массажа предстательной железы сок
собирают в количестве 0,5-1 мл в пустую
стерильную пробирку (контейнер). При
невозможности получить сок, сразу после
массажа собирают первую порцию мочи в
количестве не более 10 мл (в этой порции
содержится сок предстательной железы).
1.2.9. Смывы,
бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ). Стерильным
ватным тампоном и 5-7 мл физиологического
раствора проводят смыв, например, с
наконечника эндоскопа или бронхоскопа,
и помещают 0,5-5 мл смыва в пустую стерильную
пробирку (контейнер).
1.2.10. Фекалии. Зонд
с ватным тампоном помещают внутрь
каловых масс и слегка проворачивают,
захватывая небольшое количество
материала. Затем материал помещают в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #